經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)。以下是部分培養(yǎng)基具體的特征及應用：

       1 MEM細胞培養(yǎng)基

       又稱低限量Eagle培養(yǎng)基（Minimal Essential Medium），1959年在Eagle's基礎培養(yǎng)基（BME）上修改而來，刪去賴氨酸、生物素，氨基酸濃度增加，適合多種細胞單層生長，有可高壓滅菌品種，是一種最基本、適用范圍最廣的培養(yǎng)基，但因其營養(yǎng)成分所限，針對生產(chǎn)之特定細胞培養(yǎng)與表達時，并不一定是使用效果最佳或者最經(jīng)濟的培養(yǎng)基。

      2 BME細胞培養(yǎng)基

      基礎Eagle培養(yǎng)基（Basal Medium Eagle），1955年Eagle設計，BSS＋12種氨基酸＋谷氨酰胺＋8種維生素。簡單、便于添加，適于各種傳代細胞系和特殊研究用，在此基礎上改良的細胞培養(yǎng)基品種有MEM、DMEM、IMDM等。

      3 MDM細胞培養(yǎng)基

      Guilber、Iscove將Dulbecco'Medium改良為Iscove's Medium，用于培養(yǎng)紅細胞和巨噬細胞前體。此種培養(yǎng)液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進小鼠B淋巴細胞，LPS刺激的B細胞，骨髓造血細胞，T細胞和淋巴瘤細胞的生長。IMDM為營養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液，因此可以用于高密度細胞的快速增殖培養(yǎng)。

      4 DMEM細胞培養(yǎng)基

       DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基，起初是為小鼠成纖維細胞設計的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了。

       低糖適于依賴性貼壁細胞培養(yǎng)，特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養(yǎng)。高糖更適合高密度懸浮細胞培養(yǎng)，也適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng)，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養(yǎng)。例如CHO細胞表達生產(chǎn)乙肝疫苗、CHO細胞表達EPO。

       5 HamF10細胞培養(yǎng)基

       1963年Ham設計，含微量元素，可在血清含量低時用，適用于克隆化培養(yǎng)。F10適用于倉鼠、人二倍體細胞，特適于羊水細胞培養(yǎng)。

       6 DMEM/F12細胞培養(yǎng)基

       Ham's F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現(xiàn)在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)。由于營養(yǎng)成分豐富，且可以使用較少血清，故也常作為無血清培養(yǎng)基的基礎培養(yǎng)基。

       7 RPMI-1640細胞培養(yǎng)基

       Moore等科學家于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制，針對淋巴細胞培養(yǎng)設計，含BSS＋21種氨基酸＋維生素11種等。現(xiàn)也用于懸浮細胞培養(yǎng)，如哺乳動物、特殊造血細胞、正?；驉盒栽錾陌准毎?，雜交瘤細胞的培養(yǎng)，其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。

       8 McCoy5A培養(yǎng)基

       1959年MeCoy為肉瘤細胞設計，BSS＋40種成分?？芍С侄喾N（如骨髓、皮膚、肺和脾臟等）的原代移植物的生長，除適于一般的原代細胞培養(yǎng)外，主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細胞、人淋巴細胞、HT-29、BHL-100等上皮細胞。

       9 M199細胞培養(yǎng)基

       1950年Morgan等設計的具有確定化學成分的細胞培養(yǎng)液，即M-199。除BSS外，含有53種成分，為全面培養(yǎng)基，主要用于雞胚成纖維細胞培養(yǎng)。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長期培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細胞，并能培養(yǎng)轉染的細胞。現(xiàn)廣泛用于病毒學、疫苗生產(chǎn)。

       10 L15細胞培養(yǎng)基

       L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細胞的培養(yǎng)，用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細胞株。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系，氨基酸組成進一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖。

       細胞培養(yǎng)基必須含有充分的營養(yǎng)物質，才能滿足新細胞合成、細胞代謝等生化反應所需要的物質和能量。細胞培養(yǎng)基的主要成份是水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助營養(yǎng)物質等。此外，還可能含有血清、血清替代成分、pH指示劑等。

       如何選擇培養(yǎng)基，有幾點建議可供參考：

(1)建立某種細胞株所用的培養(yǎng)基應該是培養(yǎng)這種細胞選擇的培養(yǎng)基。可以查閱參考文獻，或在購買細胞株時咨詢。

(2)其它實驗室慣用的培養(yǎng)基不妨一試，許多培養(yǎng)基可以適合多種細胞。

(3)根據(jù)細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養(yǎng)基。如小鼠細胞株多選RPMI1640。

(4)用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細胞，觀察其生長狀態(tài)，可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷，根據(jù)實驗結果選擇最佳培養(yǎng)基，這是最客觀的方法，但比較繁瑣。

       細胞培養(yǎng)基使用過程中常見問題分析：

       由于大多數(shù)細胞適宜的pH為7.0~7.4，偏離此范圍可能對細胞生長產(chǎn)生有害的影響。但各種細胞對pH的要求也不完全相同，原代培養(yǎng)的細胞一般對pH變動耐受力差，無限細胞系耐受力強。因此，原代培養(yǎng)時，培養(yǎng)液中的緩沖系統(tǒng)就顯得較為重要。一般的細胞培養(yǎng)基采用的都是平衡鹽系統(tǒng)，但不同的培養(yǎng)基或是同一系列的培養(yǎng)基所用平衡鹽系統(tǒng)不同，如199系列、MEM系列均有Hanks’系統(tǒng)的培養(yǎng)基及Earle’s系統(tǒng)的培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基不是上述常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng)，例如RPMI1640培養(yǎng)基、F12培養(yǎng)基。MEM低血清培養(yǎng)基的平衡鹽系統(tǒng)也不是常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng)，該平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力強于常規(guī)平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力。

       細胞培養(yǎng)過程中pH值下降產(chǎn)生的原因有很多。在細胞生長非?？鞎r，pH值通常下降得很快，此時可以通過及時傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進行解決。此外，培養(yǎng)瓶蓋擰得過緊、NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、細菌、酵母或真菌污染等也能導致pH值通常下降得很快。這時，可以通過以下幾種方法解決：

1)增加培養(yǎng)液中NaHCO3濃度或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度。NaHCO3含量在2.0 g/L到3.7 g/L之間時對應的CO2濃度為5~10%

2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液

3)適當松開瓶蓋。在培養(yǎng)液中加HEPES緩沖液，使終濃度為10~25 mM

4)在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle's鹽配制的培養(yǎng)液，在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks'鹽配制的培養(yǎng)液

5)如果是污染造成的則丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。